使内毒素检测更简单、合规、更可持续
我们相信能够把复杂的测量变简单。
多年来，内毒素检测需要训练有素的技术人员为凝胶凝块和基于96孔板的化验仔细准备样品和标准品。这些分析方法的准备过程非常慢，容易出错，需要重复测试，而且不符合最新的数据完整性准则。虽然这些方法受益于用于检测内毒素的鲎试剂的敏感性和特异性，但仍希望减少鲎试剂的使用。这是因为鲎试剂是用马蹄蟹的血液制作的，我们都希望尽可能地保护和优化利用这一资源。
现在，有一种更简单的方法来实现合规的内毒素检测，并通过使用微流体的新药典内毒素检测来提高可持续性。这个方法简化了测试设置，降低了重复测试率，完全符合最新的数据完整性准则，并将鲎试剂的使用量减少了多达90%。
细菌内毒素检测的常见问题
- 为什么医药品需要进行内毒素检测？
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内毒素检测通过检测可引起严重免疫反应的有害细菌成分来确保产品安全。该质量控制程序适用于制药、医疗器械及生物技术行业中所有接触人体血液或体液的产品，包括疫苗和胰岛素等注射剂（非口服药物），以及导管、植入物和透析设备等医疗器械。作为药品生产中的关键原材料，注射用水（WFI）和其他制药用水系统同样需要定期监测内毒素。即使是微量的内毒素也可能构成危险，因此，该检测对保障患者安全和符合监管要求至关重要。
- LAL细菌内毒素检测程序是什么？
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美国FDA批准LAL（鲎试剂）测试作为兔热原测试的体外替代品已有40年历史。该测试使用马蹄蟹血清溶解液，通过三种方法检测细菌内毒素：凝胶凝固法（定性检测）、浊度法和显色法（均为定量检测）。结果通过凝胶形成、浊度或颜色变化参照标准曲线进行测定。检测要求详见美国药典USP <85>、欧洲药典EP 2.6.14、日本药典JP 4.01和中国药典ChP 1143，现已推出新型重组检测法（采用rFC或rCR）。
- 美国药典对重组BET方法有哪些指导原则？
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USP第<86>章节“使用重组试剂进行细菌内毒素检测”于2025年5月正式生效。USP <86>提供了使用非动物源性试剂，特别是重组因子C（rFC）蛋白或重组级联试剂（rCR）进行内毒素检测的附加技术。这些方法为USP <85>中所述的现有细菌内毒素检测提供了更多技术手段。
USP第<86>章节阐述了用户如何利用重组试剂的初步验证方案，通过传统LAL或重组试剂进行内毒素检测，以证明该方法适用于其预期用途。随着该章节的发布和Sievers Eclipse的使用，用户不仅能在远少于传统方法的时间内获得检测结果，更能显著提升检测过程的可持续性。使用Sievers Eclipse设置孔板（包括标准曲线）大约需要5分钟，最多可减少90%的试剂使用量。
- 使用重组细菌内毒素检测方法有哪些障碍？如何为实验室简化这些障碍？
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在采用重组试剂（如rFC或rCR）之前，用户应首先与其质量团队共同评估试剂制造商的初步验证方案，以确认在正式采用前是否存在需要补全的检测项目缺口。与采用任何新方法一样，证明该方法适合使用是一项常规要求。鉴于使用重组试剂仍被认为是一种替代方法，使用者必须证明该试剂在材料、原料药和/或药品的使用条件下适合其预期用途。如果试剂的初步验证测试存在不足，则可能需要进行补充测试。制造商设施中常见的固有微生物以及纯化的内毒素标准品可用于进行额外测试。
将当前方法与rCR试剂进行比较的并行方案或可比性研究将提供证明可比性所需的必要数据。将现有产品过渡至rCR看似充满挑战，但事实上，分析人员只需要完成替代方法测试，然后进行单批次验证，即可确认rCR试剂与显色检测等现有方法具有相似的性能表现。
像Eclipse这样的微流体平台通过快速检测设置简化了方法验证流程。借助集成的液体处理系统以及内置的内毒素标准品和PPC，可以使用LAL或rCR在几分钟内完成检测配置。
- 什么是内毒素？它为何具有危险性？
- 内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁中的脂多糖成分，其中脂质A（Lipid A）是引发发热和免疫反应的关键部分。如果这些强效毒素在与血液接触的产品中浓度超过安全水平时，可能会危及生命。在整个生产过程中，内毒素可能会污染制药用水系统、原材料和成品。水系统特别容易受到内毒素污染，因为细菌可以在管道和储水罐中形成生物膜。由于内毒素会对患者安全造成严重影响，包括美国食品药品监督管理局（FDA）在内的全球监管机构要求对所有生命科学产品进行内毒素检测。药典规定的药用水检测方法中包含了对注射用水（如注射用水和灭菌注射用水）等非肠道（注射）用水中细菌内毒素限值的要求。